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人腸平滑肌細胞 具體操作
取出凍存管: 根據(jù)細胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細胞的編號。
從液氮罐中取出細胞盒,取出所需的細胞,同時核對管外的編號。
初學(xué)者易犯錯誤:水浴鍋未預(yù)熱或者未預(yù)熱到37℃。
水浴鍋內(nèi)凍存管太多,導(dǎo)致傳熱不佳,使融化時間延長。
離心前忘記平衡,導(dǎo)致離心機損壞和細胞丟失。
一次復(fù)蘇細胞過多,忘記更換吸頭和吸管,導(dǎo)致細胞交叉污染。
實驗前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃
人腸平滑肌細胞用75%酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶 等。
迅速解凍:
迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中迅速解凍,并要不斷的搖動,使管中的液體迅速融化。
.約-2min后
凍存管內(nèi)液體*溶解,取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁,再拿入超凈臺內(nèi)。
平衡離心:用架盤天平平衡后,放入離心機中3000r/min 離心3min
制備細胞懸液:吸棄上清液。
向離心管內(nèi)加入0ml培養(yǎng)液,吹打制成細胞懸液。
活化與細胞復(fù)蘇 收到細胞株包裹時, 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形, 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng), 或立即冷凍保存(置于–70 °C, 隔夜后, 移到liq N2)。
細胞復(fù)蘇的原則-快速融化:必須將凍存在-96℃液氮中的細胞快速融化至37℃,使細胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結(jié)晶,對細胞造成損害。
細胞計數(shù):細胞濃度以5×05/ml為宜。
培養(yǎng)細胞將復(fù)合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi),將培養(yǎng)瓶放入37℃和5%CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時(或者24-48小時)后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng),換液的時間由細胞情況而定。
公司其他銷量大產(chǎn)品信息:0"SN/T 075—00 彎曲桿菌的檢測"
500 無菌采樣袋/均質(zhì)袋 00 個/袋 用于采集、儲存、運輸及均質(zhì)樣品
0708 Bolton 增菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含氯化血紅素) 50g/瓶 用于彎曲菌選擇性增菌
070 Bolton 增菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加劑 ml×5 支/盒 每支用于 00ml0708 中
5070 無菌脫纖維綿羊血 00ml/瓶
3070 無菌 Bolton 增菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含氯化血紅素) 00ml×0 瓶/箱 用于彎曲菌選擇性增菌
500 細菌學(xué)蛋白胨 50g/瓶
0709 改良 CCDA 培養(yǎng)基基礎(chǔ) 50g/瓶 用于彎曲菌選擇性分離
07 改良 CCDA 培養(yǎng)基基礎(chǔ)添加劑 ml×0 支/盒 每支用于 00ml0708 中
070 Skirrow 瓊脂基礎(chǔ) 50g/瓶 用于彎曲菌選擇性分離
07 改良 Skirrow 瓊脂基礎(chǔ)添加劑 ml×5 支/盒 每支用于 00ml070 中
0704 哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ) 50g/瓶 廣泛用于細菌培養(yǎng)
00 革蘭氏染色液 0ml×4 支/盒 用于細菌的革蘭氏染色
5070 氧化酶試劑 g/瓶 用于彎曲菌氧化酶試驗
00 氧化酶試紙 0 片/瓶 用于氧化酶試驗
340 血瓊脂平板 90mm×0 個/包 用于細菌溶血反應(yīng)
0706 3% ml×0 支/盒 用于*酶試驗
企業(yè)信息
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