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產(chǎn)品名稱:仙臺(tái)病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Sendai Virus(SV)RTPCR
規(guī)格:詳見說明書
類別:PCR檢測試劑盒
運(yùn)輸:低溫、避光、快遞免費(fèi)送貨上門。
用途:生化實(shí)驗(yàn),合成實(shí)驗(yàn)等試驗(yàn)。
運(yùn)輸及保存:低溫運(yùn)輸,-20℃保存, 保存期限為 6 個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
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性能指標(biāo):點(diǎn)擊了解更多PCR檢測試劑盒。
.試劑盒檢測特異性為00%
2. 檢測試劑盒重現(xiàn)性為00%
3. 靈敏度可達(dá)到03/ml
4. 有效期為6個(gè)月
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使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應(yīng)合成 cDNA
. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴(yán)格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應(yīng)終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應(yīng)。
5. 70℃保溫 0 分鐘以終止反應(yīng),然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)*,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 5-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至0kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.~umol或0~00pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
?pGEM 3ZF(+)英文名(EN):Cholic acid (≥98%,HPLC)CAS No.:8-25-4規(guī)格(SP):20MG類別(Key):標(biāo)準(zhǔn)品
pGEM3英文名(EN):Trimethylamine N-oxide dihydrate,≥99.0%CAS No.:62637-93-8規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
pGEMEX-英文名(EN):Trimethoxy[3-(methylamino)propyl]silan...CAS No.:3069-25-8規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
pGEN2.英文名(EN):Hyodeoxycholic acid (≥98%,HPLC)CAS No.:83-49-8規(guī)格(SP):20MG類別(Key):標(biāo)準(zhǔn)品
pGEM 5ZF(+)英文名(EN):3,4,5-Trimethoxyaniline,97%CAS No.:2433-88-0規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
pGEM 7ZF(+)英文名(EN):Deoxycholic acid (≥98%,HPLC)CAS No.:83-44-3規(guī)格(SP):20MG類別(Key):標(biāo)準(zhǔn)品
pGEM Ex英文名(EN):Trihexylamine,96%CAS No.:02-86-3規(guī)格(SP):50G類別(Key):通用試劑
pGEM-luc英文名(EN):4-Aminobenzamide,98%CAS No.:2835-68-9規(guī)格(SP):25G類別(Key):通用試劑
pGene V5-His B英文名(EN):Sesamin (≥98%,HPLC)CAS No.:607-80-7規(guī)格(SP):20MG類別(Key):標(biāo)準(zhǔn)品
pACYC77英文名(EN):2-Aminobenzenesulfonamde,98%CAS No.:3306-62-5規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
pGenesil- 英文名(EN):Sesamolin (≥98%,HPLC)CAS No.:526-07-8規(guī)格(SP):20MG類別(Key):標(biāo)準(zhǔn)品
pACYC 84英文名(EN):4-Bromo-2-(trifluoromethyl)aniline,97%CAS No.:445-02-3規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
pGenesil- 2英文名(EN):2-Bromo-4-(trifluoromethyl)aniline,97%CAS No.:57946-63-規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
pGenesil- 3英文名(EN):Triethylsulfonium bis(trifluoromethyls...CAS No.:32746-49-0規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
pGenesil-. SLOOA英文名(EN):Levodopa (≥98%,HPLC)CAS No.:59-92-7規(guī)格(SP):20MG類別(Key):標(biāo)準(zhǔn)品
pGET-4T-2英文名(EN):2-Amino-3-bromo-5-nitrobenzonitrile,97%CAS No.:760-94-4規(guī)格(SP):G類別(Key):通用試劑
pGEX英文名(EN):3-Amino-4-chlorobenzamide,96%CAS No.:9694-0-規(guī)格(SP):5G類別(Key):通用試劑
pGEX-20T英文名(EN):Paclitaxel (≥98%,HPLC)CAS No.:33069-62-4規(guī)格(SP):20MG類別(Key):標(biāo)準(zhǔn)品
仙臺(tái)病毒PCR檢測試劑盒環(huán)境,食品中有機(jī)砷標(biāo)準(zhǔn)品,不是試劑250ml國產(chǎn)
恢復(fù)供應(yīng)ERM-EC680,ERM-EC68標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)(RoHS相關(guān))250ml國產(chǎn)
一級(jí)目錄:色譜標(biāo)準(zhǔn)品和試劑 二級(jí)目錄:藥標(biāo)準(zhǔn)品250ml國產(chǎn)
有機(jī)磷藥混標(biāo)9組分250ml國產(chǎn)
數(shù)十種進(jìn)口 藥混合標(biāo)準(zhǔn)品00ml國產(chǎn)
企業(yè)信息
ENTERPRISE INFORMATION上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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