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ELISA研究組蛋白修飾和甲基化的新技術

更新時間:2015-05-14 點擊量:834


在這兩項ELISA試劑盒研究中,澳大利亞悉尼嘉萬研究所(Garvan Institute)的Sue Clark及其同事以及荷蘭內梅亨大學(Radboud University)的Hendrik Stunnenberg及其同事對染色質免疫沉淀且經過亞硫酸氫鹽處理的DNA進行測序。利用相同的DNA來評估胞嘧啶和組蛋白標記,從而克服了不同批次細胞之間的異質性問題,并能對標記之間的相互作用作出更直接的評估。通過ChIP來靶定基因組的特定區(qū)域,也能避免全基因組亞硫酸氫鹽測序帶來的高額費用。
 
為了讓這種方法行之有效,研究小組需要優(yōu)化他們的亞硫酸氫鹽處理步驟,以便接受免疫沉淀所產生的少量DNA。Clark談道:“主要的改進是讓亞硫酸氫鹽處理沒那么劇烈,并能處理75到00 ng DNA。"他們的方法很相似,并使得幾乎00%的未修飾胞嘧啶發(fā)生轉化。
 
兩個小組都利用這種技術研究了組蛋白H3第27位賴氨酸上*基化(H3K27me3)與DNA甲基化之間的串擾(cross-talk)。過去的研究表明,這兩種標記在CpG島上是互相排斥的。一種理論假設,DNA甲基化是一種更為*的標記,它取代了干細胞分化期間的H3K27me3。Stunnenberg小組的研究結果證實了這種對抗,而Clark小組則認為DNA甲基化和H3K27me3并不總是相互排斥,可以基因組區(qū)域依賴的方式共存。他們采用了不同的細胞系,這可能解釋了他們的不同結果。
 
據Clark 介紹,BisChiP-seq方法可與富集目標ELISA試劑盒DNA的任何方法共同使用,且結果是鏈特異的,提供了等位基因的分辨率。Clark下一步考慮研究其他組蛋白標記及基因組結合因子,以便了解它們與DNA甲基化組的直接關系。

00300-20000 對照品 含量測定 50mg
0030-9990 阿司咪唑 對照品 含量測定 50mg
00302-20000 對照品 含量測定 50mg
00304-200502 對照品 含量測定 00mg
00305-200502 對照品 含量測定 00mg
00306-20020 枸櫞酸氯己定 對照品 鑒別 50mg
00307-20020 對照品 含量測定 50mg
00309-20000 氫 對照品 含量測定 50mg
ELISA試劑盒0030-20020 對照品 含量測定 50mg
003-20020 3,5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯 對照品 檢查 50mg
032-000 苯噻啶 對照品 檢查 50mg
0033-20030 對照品 檢查 50mg
0034-200402 對照品 含量測定 00mg
0035-20000 對照品 檢查 50mg
0036-200402 E-異構體 對照品 檢查 30mg

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