試劑操作：規(guī)范與細節(jié)

?試劑平衡?：試劑盒從冷藏環(huán)境中取出后，應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用。

?洗滌液配置?：用蒸餾水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的蒸餾水）。

?標準品配制?：取7個1.5ml離心管，分別標注1/2,1/4,1/8,1/16,1/32,1/64,blank。從至七管中分別加入標準品/樣品稀釋液200ul。在管中加入標準品溶液200ul，置于漩渦混合器上混勻后用加樣器吸出200ul，移至第二管。

?加樣規(guī)范?：各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

?封板膜使用?：封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

?底物保存?：底物請避光保存。

在完成標準品梯度稀釋后，需特別注意標準曲線建立的精確性。建議采用雙復(fù)孔檢測模式，每次加樣前需輕柔渦旋混勻3秒，避免產(chǎn)生氣泡影響吸光度讀數(shù)。對于低濃度樣本（如1/64管），建議延長離心時間至5分鐘（1000×g）以提高沉淀回收率。

實際操作中需監(jiān)控三個關(guān)鍵控制點：一是移液器槍頭需浸入液面下2mm再緩慢釋放，防止液體掛壁；二是酶標板讀數(shù)前需用無塵紙輕拭底部光路區(qū)域；三是當室溫低于20℃時，應(yīng)將底物預(yù)熱至37℃后再使用。特殊樣本（如溶血或脂血標本）需進行10倍稀釋后重新檢測，并在報告中注明修正系數(shù)。

建議每批次實驗設(shè)置質(zhì)控血清，其回收率應(yīng)控制在95%-105%之間。若發(fā)現(xiàn)標準曲線R2值＜0.99，需檢查以下環(huán)節(jié)：稀釋槍頭是否帶殘留液體、酶標板孔是否存有交叉污染、溫育時間是否準確。對于臨界值樣本，推薦采用原倍和1:2稀釋雙孔復(fù)測取均值。